鉴于现代生命科学理论与技术的飞速发展，本书对第1版（华东理工大学出版社，2005年）内容进行了大幅度更新；并在第3版（高等教育出版社，2015年）的基础上增设了“原核细菌基因工程”“真菌基因工程”“昆虫基因工程”等章节，因而适合用作生命科学类各专业本科生和研究生“基因工程”课程的教材，同时也可作为有关研究人员的参考书。

　　早在1984年，华东理工大学就为其生物化学和生化工程专业的本科生开设了“基因工程概论”的专业选修课。书中所涉及的基本理论、实验技术和应用策略主要基于百余篇相关综述以及著者三十多年来不断充实的教学讲义和心得，编撰侧重基因工程应用的设计思路，并力求以图解的方式加深读者对本书内容的理解和印象。因而适合用作生命科学类各专业本科生和研究生“基因工程”课程的教材，同时也可作为有关研究人员的参考书。

　　第4版前言
　　诞生于20世纪70年代初的重组DNA技术是一种获取、整理、破译、编辑和表达生物遗传信息的大型综合操作平台，它以细胞生物学、分子生物学和分子遗传学的基本理论体系为基石，在基因分离克隆、基因编码产物产业化、生物遗传性状改良、基因功能及其表达调控机制诠释等方面日益显示出极高的实用价值；而作为重组DNA技术产业化应用的基因工程正在驱动着人类社会的生活方式发生重大变革。
　　早在1984年，华东理工大学就为其生物化学和生化工程专业的本科生开设了“基因工程概论”的专业选修课。本书所涉及的基本理论、实验技术和应用策略主要基于百余篇相关综述以及编者三十多年来不断充实的教学讲义和心得，编撰侧重基因工程应用的设计思路，并力求以图解的方式加深读者对本书内容的理解和印象。鉴于现代生命科学理论与技术的飞速发展，本书对第一版（华东理工大学出版社，2005年）内容进行了大幅度更新；并在第三版（高等教育出版社，2015年）的基础上增设了“原核细菌基因工程”“真菌基因工程”“昆虫基因工程”等章节，因而适于作为生命科学类各专业本科生和研究生的课程教材，同时也可作为有关人员的参考书。
　　真诚欢迎专家和读者对本书提出宝贵意见。编者
　　2016年4月于黄浦江畔

第1章概述1
1.1基因工程的基本概念1
1.1.1基因工程的基本定义1
1.1.2基因工程的基本过程1
1.1.3基因工程的基本原理2
1.1.4基因工程的基本体系2
1.2基因工程的发展历史4
1.2.1基因工程的诞生4
1.2.2基因工程的成熟5
1.2.3基因工程的腾飞5
1.3基因工程的研究意义6
1.3.1第四次工业大革命6
1.3.2第二次农业大革命7
1.3.3第四次医学大革命7
第2章DNA重组克隆单元操作9
2.1DNA重组的载体9
2.1.1质粒载体9
2.1.2病毒或噬菌体载体13
2.1.3噬菌体质粒杂合载体19
2.1.4人造染色体载体21
2.2DNA的体外重组（切与接）21
2.2.1限制性核酸内切酶22
2.2.2T4DNA连接酶26
2.2.3其他用于DNA重组的工具酶26
2.2.4DNA切接反应的影响因素30
2.2.5DNA分子重组的方法34
2.3重组DNA分子的转化与扩增（转与增）41
2.3.1重组DNA转化的基本概念42
2.3.2细菌受体细胞的选择43
2.3.3细菌受体细胞的转化方法44
2.3.4转化率及其影响因素47
2.3.5转化细胞的扩增48
2.4转化子的筛选与重组子的鉴定（检）48
2.4.1基于载体遗传标记的筛选与鉴定49
2.4.2基于克隆片段序列的筛选与鉴定51
2.4.3基于外源基因表达产物的筛选与鉴定66
2.5目的基因的克隆68
2.5.1鸟枪法68
2.5.2cDNA法71
2.5.3PCR扩增法79
2.5.4化学合成法85
2.5.5基因文库的构建88
第3章大肠杆菌基因工程93
3.1外源基因在大肠杆菌中的高效表达原理93
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