本书全面系统地阐述了微生物技术的基本理论、基础知识和基本实践操作方法。全书共十单元,包括微生物技术的基本要求,微生物形态观察技术、培养技术、生长测定技术、分离纯化及鉴定技术、选育技术、菌种保藏技术,环境微生物及其检测技术,病毒学技术和免疫学技术。各单元附有相关的技能训练、阅读材料和复习参考题。本书的编写注重了理论与技能的兼容,具有较强的启发性和实用性。本书可作为高等院校生物技术类专业课程教材,也可供食品科学、质量检验、饲料等其他专业师生和从事生物技术工作的科技人员参考。
微生物技术是高等职业院校生物技术类专业的一门核心专业基础课,其内容广泛,发展迅速。通过本课程的学习,应使学生对微生物学有较全面的了解,掌握本学科的基本理论、基础知识和基本实践操作技能,培养分析和解决相关问题的能力,能更好地快速胜任有关微生物技术方面的多个岗位的工作。本书适用于生物技术类专业的教学,也可供食品科学、质量检验、饲料等其他专业师生和从事生物技术工作的科技人员参考使用。本书是以河南牧业经济学院(原郑州牧业工程高等专科学校)的微生物学国家级精品课程和国家级精品资源共享课建设项目为依托,编写人员具有较丰富的课改、教材建设经验。在编写过程中,严格按照教育部颁布的教育改革文件精神,把以能力为本位作为教育教学的指导思想,贯穿教、学、做合一的理念,以岗位需求为导向,重点培养学生的职业能力、实践能力和创新精神。教材在内容设计上,坚持必需、够用的原则,基于工作任务为载体构建教学内容,以完成工作任务为行动导向和学习目标,设计了十个教学情境,即十个单元,分别介绍微生物技术的基本要求,微生物形态观察技术、培养技术、生长测定技术、分离纯化及鉴定技术、选育技术、菌种保藏技术,环境微生物及其检测技术,病毒学技术和免疫学技术。在结构体系上,每一单元都包含了该微生物技术所要求掌握的理论知识和多项技能训练内容,注重理论的实用性和技能的可操作性。本书注重了理论与技能的兼容,具有较强的启发性和实用性。在此,对悉心审阅本书并给予中肯指导的边传周教授表示衷心的谢意!另外,在编写过程中参考了一些同仁的著作和论文,在此深表谢意!本教材配套立体资源丰富,读者可从国家精品资源共享课网站、河南牧业经济学院网站和化学工业出版社教学服务网站(www.cipedu.com.cn)免费下载。限于编者的知识水平和能力,书中难免会存在不足之处,欢迎同行和广大读者批评指正。编者2017年3月
第一单元微生物技术的基本要求1
模块一认识微生物1
一、微生物的定义1
二、微生物的主要类群1
三、微生物的主要特点1
四、微生物的分类单位和命名3
五、微生物的应用3
模块二微生物技术的基本要求4
一、无菌操作4
二、微生物技术的安全要求4
三、微生物实验室要求及建设5
四、微生物技术常用设备及器材7
阅读材料微生物学发展简史13
复习参考题16
第二单元微生物形态观察技术18
模块一显微镜的种类及结构18
一、普通光学显微镜的基本构造18
二、普通光学显微镜的光学原理20
三、几种特殊的光学显微镜22
模块二显微镜操作技术25
一、准备工作及观察要求25
二、光源的调节26
三、低倍镜的使用方法26
四、高倍镜的使用方法26
五、油镜的使用方法26
六、显微镜使用后的处理27
七、显微镜的维护和保养27
模块三细菌形态观察技术27
一、细菌的形态和大小28
二、细菌细胞的构造30
三、细菌的生长繁殖42
四、细菌的群体特征42
五、常用常见的细菌44
技能训练1细菌简单染色技术48
技能训练2革兰染色技术49
模块四放线菌形态观察技术51
一、放线菌的形态和构造51
二、放线菌的生长繁殖52
三、放线菌的群体特征53
四、常用常见的放线菌53
技能训练3放线菌的形态观察54
模块五酵母菌形态观察技术56
一、酵母菌的形态和构造56
二、酵母菌的生长繁殖57
三、酵母菌的菌落特征58
四、常用常见的酵母菌58
技能训练4酵母菌的形态观察60
阅读材料自酿葡萄酒技术61
模块六霉菌形态观察技术62
一、霉菌的形态和构造62
二、霉菌的生长繁殖64
三、霉菌的菌落特征66
四、常用常见的霉菌66
技能训练5霉菌的形态观察69
模块七蕈菌71
复习参考题73
第三单元微生物培养技术75
模块一微生物的营养75
一、微生物的化学组成75
二、微生物的营养要素75
三、微生物的营养类型79
四、营养物质进入微生物细胞的方式80
模块二培养基制备技术83
一、培养基的配制原则83
二、培养基的种类85
技能训练6培养基制备技术87
模块三微生物控制技术89
一、控制微生物生长的物理方法89
二、控制微生物生长的化学方法92
技能训练7干热灭菌95
技能训练8高压蒸汽灭菌96
技能训练9紫外线杀菌实验98
技能训练10化学药剂对微生物生长的影响99
模块四微生物的生长101
一、接种技术101
二、影响微生物生长的主要因素101
三、微生物的生长规律104
技能训练11微生物的接种技术107
模块五微生物的代谢110
一、微生物的新陈代谢110
二、微生物的产能代谢110
三、微生物的代谢调节118
模块六微生物的培养方法121
一、实验室的微生物培养法122
二、生产实践中的微生物培养法123
技能训练12枯草芽孢杆菌摇瓶培养124
技能训练13酸奶制作125
复习参考题125
第四单元微生物生长测定技术127
模块一微生物细胞数目的测定技术127
一、显微镜直接计数法127
二、平板菌落计数法127
三、最大可能数计数法128
四、光电比浊计数法128
五、薄膜计数法129
技能训练14显微镜直接计数法129
技能训练15平板菌落计数法131
技能训练16比浊法测定大肠杆菌的生长曲线133
模块二微生物生长量的测定技术134
一、测体积法134
二、称质量法135
三、生理指标法135
四、丝状微生物菌丝长度的测定135
复习参考题136
第五单元微生物分离纯化及鉴定技术137
模块一微生物纯培养的分离方法137
一、划线法137
二、稀释平板法137
三、单细胞挑取法137
四、选择培养基分离法138
五、小滴分离法138
技能训练17微生物的分离纯化138
技能训练18厌氧菌的分离和培养141
技能训练19食用菌组织分离技术143
模块二微生物的鉴定技术144
一、微生物的经典分类鉴定方法144
二、微生物的现代分类鉴定方法146
三、微生物快速鉴定和自动化分析方法148
技能训练20大分子物质的水解试验153
技能训练21糖发酵试验154
技能训练22甲基红(M.R.)试验156
技能训练23乙酰甲基甲醇(V.P.)试验156
技能训练24吲哚试验158
技能训练25三糖铁琼脂试验159
技能训练26BIOLOG系统进行微生物的分类鉴定160
复习参考题162
第六单元微生物选育技术163
模块一微生物的遗传变异163
一、微生物遗传变异的基本概念163
二、遗传变异的物质基础164
模块二微生物的育种技术167
一、基因突变167
二、基因重组171
三、微生物的菌种选育174
技能训练27从自然界筛选-淀粉酶生产菌种182
技能训练28蛋白酶高产菌株的选育183
复习参考题186
第七单元微生物菌种保藏技术187
模块一菌种的衰退和复壮187
一、菌种的衰退187
二、菌种的复壮189
模块二菌种的保藏190
一、菌种保藏的目的和原理190
二、菌种保藏的方法190
三、菌种保藏的分工和机构192
四、菌种的获取方法193
技能训练29菌种保藏193
复习参考题200
第八单元环境微生物及其检测技术201
模块一微生物在自然界中的分布201
一、土壤中的微生物201
二、水体中的微生物201
三、空气中的微生物202
四、工农业产品中的微生物202
五、正常人体及动物体上的微生物203
六、极端环境中的微生物204
模块二微生物与生物环境间的关系205
一、互生205
二、共生206
三、寄生206
四、拮抗206
五、捕食206
模块三微生物与环境保护207
一、微生物对污染物的降解与转化207
二、重金属的转化207
三、污染介质的微生物处理208
四、污染环境的生物修复210
五、环境污染的微生物监测211
技能训练30水中细菌总数的测定212
技能训练31多管发酵法测定水中大肠菌群数214
技能训练32空气中细菌总数的测定216
阅读材料GB/T 4789.32010大肠菌群计数食品卫生微生物学检验217
复习参考题221
第九单元病毒学技术222
模块一病毒的形态结构和化学组成222
一、病毒的大小及形态222
二、病毒的结构、化学成分及其功能223
三、病毒结构的对称性224
四、病毒的群体形态225
五、噬菌体225
模块二病毒的增殖226
一、病毒增殖的一般过程226
二、一步生长曲线229
三、温和噬菌体与溶源菌229
四、理化因素对病毒的作用230
模块三病毒的一般诊断程序232
一、标本的采集和处理232
二、病毒的分离培养232
三、病毒的鉴定233
四、病毒的分类与命名234
阅读材料亚病毒235
模块四常见的动物病毒236
一、猪瘟病毒236
二、猪繁殖与呼吸综合征病毒236
三、禽流行性感冒病毒237
四、鸡新城疫病毒237
五、鸡传染性法氏囊病病毒238
技能训练33抗噬菌体菌株的选育238
技能训练34病毒的鸡胚培养240
技能训练35病毒的血凝及血凝抑制试验243
复习参考题246
第十单元免疫学技术247
模块一免疫的概念、功能和类型247
一、免疫的概念247
二、免疫的基本功能247
三、免疫的类型248
模块二非特异性免疫248
一、非特异性免疫的构成248
二、影响非特异性免疫的因素250
三、非特异性免疫的增强剂250
模块三特异性免疫251
一、免疫系统251
二、抗原253
三、抗体255
四、机体的免疫应答257
阅读材料揭开新生儿溶血病的秘密259
技能训练36琼脂双向免疫扩散试验259
技能训练37凝集试验260
技能训练38酶联免疫吸附试验262
复习参考题263
附录Ⅰ微生物学实验技能综合测试264
技能测试题一细菌形态的观察264
一、测试目的264
二、测试内容264
三、实验器材264
四、微生物学实验技能测试评分表264
技能测试题二培养基的制备264
一、测试目的264
二、测试内容264
三、实验器材264
四、微生物学实验技能测试评分表264
技能测试题三细菌的分离纯化264
一、测试目的264
二、测试内容265
三、实验器材265
四、微生物学实验技能测试评分表265
附录Ⅱ染色液的配制268
附录Ⅲ常用培养基配方269
附录Ⅳ试剂和溶液的配制273
附录Ⅴ常用的微生物学名275
附录Ⅵ洗涤液的配制与使用276
一、洗涤液的配制276
二、原理276
三、使用注意事项276
参考文献277