本书整合细胞生物学、生物化学、分子生物学和医学遗传学4门课程的实验内容,删除验证性实验,精简基础性实验,加强问题(或案例)为引导的综合性实验和探究性实验。本书包括四篇内容,第一篇为医学生物学技术基本原理,包括显微镜与细胞微观结构、生物大分子制备与分离技术、分光光度技术、放射性同位素技术和人类染色体的识别。同时还包括实验误差与数据处理的内容。第二篇为基础性实验,共14个,重在培养学生的基本操作技能。第三篇为综合性实验,共18个,重在培养学生综合运用不同实验技术解决问题的能力。第四篇为2个探究性实验的例子,作为开展探究性实验的参考,在其后附注了实验设计基本原则。最后的附录部分包括实验须知、实验记录及实验报告的书写、细胞生物学绘图、常用元素原子量表、实验室常用酸碱的比重和浓度等内容。
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目录
第一篇 医学生物学技术基本原理
第一章 显微镜与细胞的微观结构 1
第一节 普通光学显微镜 1
第二节 细胞的超微结构 9
第二章 生物大分子制备与分离技术 14
第一节 生物大分子的基本制备技术 14
第二节 层析技术 19
第三节 电泳技术 29
第四节 离心技术 39
第三章 分光光度技术 42
第四章 放射性同位素技术 46
第五章 人类染色体的识别 52
第六章 实验误差与数据处理 57
第二篇 基础性实验
实验一 细胞的基本形态结构 62
实验二 细胞的显微结构与超微结构 67
实验三 细胞计数与显微测量 72
实验四 HEK293细胞的传代培养、冻存与复苏 76
实验五 大鼠皮质神经细胞的原代培养 80
实验六 比色法测定蛋白质的含量 83
实验七 紫外吸收法测定蛋白质含量 88
实验八 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定未知蛋白质的分子量 90
实验九 兔肝基因组DNA的提取与纯化 95
实验十 PCR技术扩增大鼠Crybb2基因 97
实验十一 DNA琼脂糖凝胶电泳 99
实验十二 果蝇唾腺染色体标本的制备与观察 101
实验十三 人外周血淋巴细胞染色体标本制备 104
实验十四 人染色体G显带技术及G显带核型分析 106
第三篇 综合性实验
实验十五 兔肝组织细胞核和线粒体的分级分离 108
实验十六 氧化应激诱导PC12细胞凋亡 111
实验十七 血清蛋白的分离纯化与鉴定 114
实验十八 兔肝碱性磷酸酶的提取纯化与比活性测定 118
实验十九 碱性磷酸酶米氏常数的测定 125
实验二十 激素对血糖水平的调节作用 128
实验二十一 烟酸衍生物对血脂的影响 132
实验二十二 四氯化碳致急性肝损伤的组织学与肝功能检测 137
实验二十三 质粒的碱裂解法制备及电泳检测 141
实验二十四 大鼠β-晶体蛋白B2在大肠埃希菌中的诱导表达 145
实验二十五 Southern Blot技术检测人胶质瘤细胞EGFR基因的扩增 147
实验二十六 Northern Blot技术检测大鼠HIF-1α mRNA表达 152
实验二十七 Myc-PSD-95-PDZ1融合蛋白在HEK293细胞中的表达 155
实验二十八 利用定点突变技术构建活化型n-Src的重组质粒 159
实验二十九 环磷酰胺对小鼠骨髓嗜多染红细胞的毒性作用 164
实验三十 人乳腺癌组织中ERBB2基因扩增的检测 166
实验三十一 人基因性别的鉴定 169
实验三十二 大鼠骨髓间充质干细胞成脂成骨的定向诱导分化 172
第四篇 探究性实验
例1 脑缺血再灌注格尔德霉素神经保护作用的机制研究 175
例2 EZH2对大鼠骨髓间充质干细胞成脂成骨分化的影响 177
附录 181