间接免疫荧光法检测抗核抗体(ANA)是美国风湿病学会(ACR)、欧洲自身免疫标准化促进会(EASI)等专业学会推荐的参考方法,也是系统性自身免疫病(SARD)相关自身抗体检测的金标准。以HEp — 2细胞为底物的间接免疫荧光法(HEp — 2 IFA)检测结果包括抗体滴度和荧光核型,对抗体滴度或荧光强度进行评估可确定抗体水平,而荧光核型不仅能为后续特异性靶抗原检测提供指导,还因其与各种疾病的相关性而对临床诊疗具有重要意义。
ANA荧光核型的判读具有相当的难度且判读过程存在一定主观性,因此实验室核型判读人员需要具备扎实的理论基础和丰富的判读经验。此外,实验室检测人员熟悉不同荧光核型对应的靶抗原及其与疾病的关系,对于检验报告的准确发放和临床沟通也至关重要。目前,ANA荧光核型国际共识(ICAP)命名并定义了30种荧光核型。2018年,中国医师协会风湿免疫科医师分会自身抗体检测专业委员会发布了《抗核抗体检测的临床应用专家共识》,其中不仅明确了HEp — 2 IFA为ANA检测的参考方法,还结合国内ANA检测的实践经验,定义了13种必报荧光核型和15种选报荧光核型。ANA荧光核型判读的逐步标准化和规范化,对基于HEp — 2 IFA的SARD筛查具有重要意义,同时也对实验室检测人员提出了更高的要求。
目前,国内基于HEp — 2 IFA的自身抗体检测专业图谱类参考书较少,按照ICAP标准进行编写的荧光图谱更是稀缺。为了满足临床医师和实验室检测人员不断发展的专业需求,上海交通大学医学院附属仁济医院检验科自身抗体检测组于2017年开始进行图谱筹备工作,历时3年,建立了完善的ANA荧光核型血清样本库及图片库。2020年,在与国内自身抗体实验室检测领域及临床风湿免疫科的多位专家商讨后启动了本书的编写工作,并经多位专家、同行反复修改讨论最终定稿。
《抗核抗体荧光核型图谱及病例判读》以ICAP定义的30种荧光核型为标准,对每种核型的荧光特征,相应靶抗原的生物学功能、临床意义和检测方法进行了详细阐述。针对这部分内容,特别考虑到如下问题:① 不同品牌HEp — 2细胞荧光核型特征可能略有差异;② 不同自身抗体商品化试剂盒因方法学不同、包被的抗原来源不同(天然纯化/重组)和重组蛋白片段不同等因素,可能存在检测结果差异。因此,本书纳入了国内自身抗体实验室较常用的商品化试剂,并且在特异性抗体检测部分,列举了试剂盒具体包被的抗原成分。此外,根据核型的复杂程度将图谱分为基础级和疑难级,并以荧光核型图谱结合临床病例的形式呈现。每个病例包含简要的实验室检测结果、临床诊断/表现、核型判读结果和判读说明等内容,对初学者乃至有一定经验的核型判读人员都有很好的参考价值。当然,本书稿件虽历经数次修改,但难免存在错误及不足之处,敬请同行和广大读者批评指正。
在此,感谢所有在本书编写过程中给予指导和帮助的专家、同行。感谢上海交通大学医学院附属仁济医院风湿免疫科和检验科全体同仁的大力支持。感谢上海交通大学医学院附属仁济医院检验科自身抗体检测组所有人员的辛勤付出。借此机会,代表编写组全体专家谨向自身抗体检测领域所有前辈、临床一线医师及实验室检测人员致以诚挚的敬意和衷心的感谢。
由衷希望《抗核抗体荧光核型图谱及病例判读》一书有助于进一步规范抗核抗体间接免疫荧光法核型的判读,同时帮助实验室检测人员和临床医师深入理解荧光核型对疾病诊疗的重要意义。相信随着科学技术不断进步,间接免疫荧光法检测抗核抗体联合其他特异性靶抗原检测,必将显著提升临床自身免疫病的精准诊疗能力。
郑 冰
上海交通大学附属仁济医院
2021年1月
郑冰:医学博士,副主任技师,硕士研究生导师。任上海交通大学医学院附属仁济医院检验科自身免疫组负责人。中国中西医结合检验医学专业青年委员会副主委,中国麻风防治协会皮肤性病检验与诊断分会青年委员会副主任委员,抗核抗体荧光核型国际共识中文翻译团队负责人。
吕良敬:医学博士,主任医师,博士研究生导师。任上海交通大学医学院附属仁济医院风湿科副主任。国家重点研发计划“精准医学研究”重点专项首席科学家,上海市风湿病研究所副所长,上海医师协会风湿病分会副会长,中国医师协会风湿病分会常委。
李敏:医学博士,研究员,博士研究生导师。任上海交通大学医学院附属仁济医院检验科主任。中华医学会检验医学分会青年委员会副主任委员,上海市医学会检验医学专科分会副主任委员,上海市微生物学会常务理事兼秘书。
第一章
抗核抗体概述 / 001
第一节 · 抗核抗体定义及分类 / 002
一、 抗核抗体定义 / 002
二、 抗核抗体谱的分类 / 002
第二节 · 抗核抗体常用检测方法 / 003
一、 间接免疫荧光法 / 003
二、 线性免疫印迹法 / 007
三、 化学发光免疫分析法 / 009
四、 可寻址激光珠免疫分析法 / 009
五、 数码液相芯片技术 / 011
六、 酶联免疫吸附试验 / 012
第三节 · 不同自身抗体谱检测的临床意义 / 014
一、 抗核抗体谱 / 014
二、 自身免疫性肝病抗体谱 / 014
三、 系统性硬化症抗体谱 / 015
四、 肌炎抗体谱 / 015
第二章
间接免疫荧光法检测抗核抗体 / 017
第一节 · 实验室检测质量控制 / 018
一、 项目开展前 / 018
二、 项目开展时 / 020
第二节 · 荧光核型判读策略 / 021
一、 国际抗核抗体荧光核型共识 / 021
二、 荧光核型判读流程 / 022
第三节 · 荧光核型报告解读 / 022
一、 荧光核型报告的临床建议 / 022
二、 不同荧光核型相关自身抗体 / 022
第三章
抗核抗体荧光核型标准图谱及靶抗原介绍 / 029
第一节 · 阴性(AC — 0) / 030
第二节 · 均质型(AC — 1) / 030
第三节 · 核颗粒型(AC — 2/AC — 4/AC — 5/AC — 29) / 039
一、 致密细颗粒型(AC — 2) / 039
二、 细颗粒型(AC — 4) / 042
三、 粗颗粒型(AC — 5) / 049
四、 Topo Ⅰ型 (AC — 29) / 056
第四节 · 着丝点型(AC — 3) / 060
一、 着丝点型(AC — 3) / 060
第五节 · 核点型(AC — 6/AC — 7) / 064
一、 核多点型(AC — 6) / 064
二、 核少点型(AC — 7) / 068
第六节 · 核仁型(AC — 8/AC — 9/AC — 10) / 072
一、 核仁均质型(AC — 8) / 072
二、 核仁斑片型(AC — 9) / 076
三、 核仁颗粒型(AC — 10) / 078
第七节 · 核膜型(AC — 11/AC — 12) / 082
一、 光滑核膜型(AC — 11) / 082
二、 点状核膜型(AC — 12) / 085
第八节 · 核多形性型(AC — 13/AC — 14) / 089
一、 PCNA样型(AC — 13) / 089
二、 着丝粒F样型(AC — 14) / 091
第九节 · 胞浆纤维型(AC — 15/AC — 16/AC — 17) / 094
一、 胞浆线性/肌动蛋白型(AC — 15) / 094
二、 胞浆丝状/微管型(AC — 16) / 097
三、 胞浆节段型(AC — 17) / 100
第十节 · 胞浆颗粒型(AC — 18/AC — 19/AC — 20) / 104
一、 胞浆散点型(AC — 18) / 104
二、 胞浆致密颗粒型(AC — 19) / 107
三、 胞浆细颗粒型(AC — 20) / 111
第十一节 · 其他胞浆核型(AC — 21/AC — 22/AC — 23) / 115
一、 胞浆网状/线粒体样型(AC — 21) / 115
二、 胞浆极性/高尔基体样型(AC — 22) / 118
三、 胞浆棒环状型(AC — 23) / 120
第十二节 · 有丝分裂期核型(AC — 24/AC — 25/AC — 26/AC — 27/AC — 28) / 123
一、 中心体型(AC — 24) / 123
二、 纺锤体型(AC — 25) / 126
三、 NuMA型(AC — 26) / 128
四、 细胞间桥型(AC — 27) / 130
五、 染色体型(AC — 28) / 132
第四章
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抗核抗体间接免疫荧光法核型图谱(疑难) / 241
病例1 · 系统性红斑狼疮 / 244
病例2 · 健康查体 / 245
病例3 · 慢性肾脏疾病 / 246
病例4 · 间质性肺炎 / 247
病例5 · 结缔组织病 / 248
病例6 · 关节痛 / 249
病例7 · 健康查体 / 250
病例8 · 糖尿病 / 251
病例9 · 间质性肺炎 / 252
病例10 · 间质性肺炎 / 253
病例11 · 关节痛 / 254
病例12 · 健康体检 / 255
病例13 · 水肿 / 256
病例14 · 复发性流产 / 257
病例15 · 发热 / 258
病例16 · 双眼闭角型青光眼 / 259
病例17 · 口干燥症 / 260
病例18 · 脂肪肝 / 261
病例19 · 慢性肾小球肾炎 / 262
病例20 · 关节痛 / 263
病例21 · 食管恶性肿瘤 / 264
病例22 · 间质性肺炎 / 265
病例23 · 健康查体 / 266
病例24 · 胃癌术后随访检查 / 267
病例25 · 系统性红斑狼疮 / 268
病例26 · 皮肌炎 / 269
病例27 · 抗合成酶综合征 / 270
病例28 · 关节痛 / 271
病例29 · 脑梗死 / 272
病例30 · 原发性胆汁性胆管炎 / 273
病例31 · 干燥综合征 / 274
病例32 · 关节痛 / 275
病例33 · 胡言乱语,词不达意,非特异性脑炎可能 / 276
病例34 · 关节痛 / 277
病例35 · 系统性红斑狼疮 / 278
病例36 · 强直性脊柱炎 / 279
病例37 · 系统性红斑狼疮 / 280
病例38 · 口干燥症 / 281
病例39 · 系统性红斑狼疮 / 282
病例40 · 脑梗死 / 283
病例41 · 皮肌炎 / 284
病例42 · 关节痛 / 285
病例43 · 进行性系统性硬化症 / 28
病例44 · 雷诺现象 / 287
病例45 · IgG肾病 / 288
病例46 · 结肠恶性肿瘤 / 289
病例47 · 关节痛 / 290
病例48 · 干燥综合征 / 291
病例49 · 消瘦 / 292
病例50 · 系统性红斑狼疮 / 293
病例51 · 自身免疫性肝炎 / 294
病例52 · 自身免疫性肝炎 / 295
病例53 · 结缔组织病 / 296
病例54 · 自身免疫性肝炎 / 297
病例55 · 系统性红斑狼疮 / 298
病例56 · 系统性红斑狼疮 / 299
病例57 · 肝损害 / 300
病例58 · 系统性红斑狼疮 / 301
病例59 · 关节痛 / 302
病例60 · 干燥综合征 / 303
病例61 · 干燥综合征 / 304
病例62 · 健康查体 / 305
病例63 · 具有流产史者的妊娠监督 / 306
病例64 · 发热 / 307
病例65 · 多发性骨髓瘤 / 308
病例66 · 具有自然流产史者的妊娠监督 / 309
病例67 · 关节痛 / 310
病例68 · 腰椎间盘突出,膝关节痛 / 311
病例69 · 健康体检 / 312
病例70 · 慢性肝病 / 313
病例71 · 唇溃疡 / 314
病例72 · 系统性红斑狼疮 / 315
病例73 · 系统性红斑狼疮 / 316
病例74 · 系统性红斑狼疮,原发性甲状腺亢进,肝损害 / 317
病例75 · 结缔组织病 / 318
病例76 · 结缔组织病 / 319
病例77 · 健康查体 / 320
病例78 · 慢性肝病 / 321
病例79 · 干燥综合征 / 322
病例80 · 急性药物性肝衰竭 / 323
病例81 · 关节痛 / 324
病例82 · 结缔组织病 / 325
病例83 · 关节痛 / 326
病例84 · 健康查体 / 327
病例85 · 蛋白尿 / 328
病例86 · 肝损害 / 329
病例87 · 慢性肝病 / 330
病例88 · 健康查体 / 331
病例89 · 系统性红斑狼疮 / 332
病例90 · 不详 / 333
病例91 · 结缔组织病 / 334
病例92 · 系统性红斑狼疮 / 335
病例93 · 高危妊娠 / 336
病例94 · 关节痛 / 337
病例95 · 类风湿性关节炎 / 338
病例96 · 慢性肾小球肾炎,过敏性皮炎 / 339
病例97 · 狼疮性肾炎 / 340
病例98 · 系统性红斑狼疮 / 341
病例99 · 雷诺现象,关节痛,结缔组织病 / 342
病例100 · 间质性肺炎 / 343
病例101 · 干燥综合征 / 344
病例102 · 混合性结缔组织病,膜性肾病(Ⅰ期) / 346
病例103 · 类风湿性关节炎 / 348
病例104 · 系统性红斑狼疮 / 350
病例105 · 原发性胆汁性胆管炎 / 352
病例106 · 类风湿性关节炎,干燥综合征 / 354
附录 常用术语缩写词英汉对照 / 356