《化学生物学实验(第二版)》共8章,第1、2章介绍了化学生物学实验基本知识和基本操作。第3~8章是实验部分,共编写了37个实验,包括生化分离分析实验、生物材料制备实验、化学中基因工程实验、化学中蛋白质工程实验、化学中细胞工程实验和探索性实验。书后的附录介绍了化学生物学实验特殊试剂的配制和*新生物信息数据库等资料。为了适应信息化教学的需求,《化学生物学实验(第二版)》配套了部分实验仪器的使用、代表性实验操作及相关内容等数字化资源,读者可扫描《化学生物学实验(第二版)》二维码观看。
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目录
第二版序
第二版前言
**版前言
第1章 化学生物学实验基本知识 1
1.1实验室规则及须知 1
1.2实验室安全及防护知识 1
1.2.1生物源的危害和防护 1
1.2.2放射性和紫外线辐射的危害和防护 2
1.2.3生物样品的存放 2
1.2.4生物类实验废弃物的处理 2
1.2.5其他的实验室安全及防护知识、实验室废弃物处理 3
第2章 化学生物学实验基本操作 5
2.1常用仪器的洗涤 5
2.1.1玻璃器皿的洗涤 5
2.1.2其他材质器皿的洗涤 5
2.2常用消毒灭菌方法 6
2.2.1物理消毒灭菌方法 6
2.2.2化学消毒灭菌方法 6
2.3化学生物学样品的处理和纯化 7
2.3.1材料的选取和前处理 7
2.3.2细胞的破碎 7
2.3.3蛋白质的提取和纯化 8
2.3.4核酸的提取和纯化 8
2.3.5样品的浓缩和干燥 9
2.4离心技术 9
2.4.1离心技术的原理 9
2.4.2离心机的类型和转头的分类 10
2.4.3常用离心方法 11
2.4.4高速冷冻离心机 12
2.5常用色谱分离技术 13
2.5.1凝胶色谱 13
2.5.2离子交换色谱 14
2.5.3反相色谱 14
2.6电泳技术 14
2.6.1基本原理 14
2.6.2琼脂糖凝胶电泳 15
2.6.3聚丙烯酰胺凝胶电泳 15
2.6.4毛细管电泳 16
2.6.5凝胶成像技术 16
2.7 PCR技术 16
2.7.1 PCR技术简介 16
2.7.2 PCR技术的基本原理和过程 17
2.7.3 PCR的五个元素 17
2.7.4 PCR仪及其使用 18
2.8细胞培养技术 19
2.8.1体外培养细胞的分类 19
2.8.2培养细胞的生长和增殖过程 20
2.8.3原代细胞的培养 21
2.9其他仪器的使用 21
2.9.1移液枪 21
2.9.2气相色谱仪 22
2.9.3液相色谱仪 24
2.9.4红外光谱仪 24
2.9.5荧光分光光度计 25
2.9.6二氧化碳培养箱 26
2.9.7倒置相差显微镜 27
2.9.8酶标仪 29
2.9.9活体荧光成像系统 29
2.9.10激光粒度仪 30
2.9.11流式细胞仪 31
第 3章 生化分离分析实验 32
实验 1疏水作用色谱分离纯化 .-淀粉酶 32
实验 2亲和色谱树脂的制备及溶菌酶的提取纯化 37
实验 3青霉素酰化酶米氏常数和反应活性的测定 42
实验 4静电自组装构筑 HRP多层膜电极检测酚类物质研究 46
实验 5 FRET法及荧光猝灭法测定蛋白酶的活性 49
第 4章 生物材料制备实验 55
实验 6生物矿物和生物矿化——碳酸钙多形的控制与制备 55
实验 7无定形碳酸钙的制备和转化 58
实验 8聚乙烯亚胺-DNA复合物粒径和表面电荷的测定 61
实验 9复凝聚法制备阿霉素微囊及其质量评价 63
实验 10盐酸左氧氟沙星不同晶型的制备及其表征 66
第 5章 化学中基因工程实验 70
实验 11大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒 DNA的转化 70
实验 12琼脂糖凝胶电泳分离 DNA片段 73
实验 13 PCR基因扩增获取毛囊 DNA及其分离 75
实验 14植物基因组 DNA的提取与扩增 77
实验 15 PCR-RFLP法检测单核苷酸多态性 81
实验 16基于连接反应的滚环扩增技术检测单核苷酸多态性 86
实验 17枯草杆菌脂肪酶 A的基因克隆 89
第 6章 化学中蛋白质工程实验 96
实验 18 2′-脱氧尿苷衍生物的酶促合成的选择性调控 96
实验 19酶催化迈克尔加成反应 98
实验 20 Novozym 435催化的 1-位芳基取代的末端炔丙醇动力学拆分反应 100
实验 21金属卟啉模拟的生物氧化过程 102
实验 22操控式分子动力学模拟:以泛素蛋白的 3D结构研究为例 106
实验 23新冠病毒受体结合域 (RBD)与受体蛋白 ACE2相互作用的分子模拟 121
实验 24 Docking:以新冠病毒刺突蛋白受体结合域 (RBD)与橙皮苷分子对接为例 130
第7章 化学中细胞工程实验 140
实验 25 MTT法测定聚乙烯亚胺的细胞毒性 140
实验 26抗肿瘤药物 5-氟尿嘧啶对肿瘤细胞的抑制及细胞形态观察 142
实验 27基于荧光分子探针的细胞内活性氧水平测定 144
实验 28抗肿瘤药物 5-氟尿嘧啶对肿瘤细胞迁移的影响 146
实验 29聚乙烯亚胺 -DNA复合物体外细胞转染实验 148
实验 30聚乙烯亚胺携带基因在细胞中的荧光染色实验 150
实验 31聚乙烯亚胺作为基因载体材料携带 TRAIL基因对细胞凋亡的影响 153
实验 32聚乙烯亚胺 -阿霉素复合物的细胞摄取实验 156
实验 33聚乙烯亚胺 -阿霉素实体瘤原位注射成像实验 158
实验 34流式细胞技术检测细胞增殖实验 159
第 8章 探索性实验 162
实验 35环糊精-聚乙烯亚胺聚合物的合成及携带基因药物的性质实验 162
实验 36 脂肪酶 CALB的理性设计及其对仲醇立体选择性的调控 165
实验 37大豆食品中转基因成分的分析 171
参考文献 175
附录 178附录 1常用化学生物学缓冲溶液的配制 178
附录 2常用特殊化学生物学试剂的配制 179
附录 3生物信息数据库 180