《微生物检验》(第二版)从企业的实际要求出发,分析了企业微生物检测典型的工作任务,对工作任务中包含的关键技能进行了分析,同时参考国家职业标准有关要求,按照突出重点、覆盖全面、难易结合的原则,形成“以企业微生物典型检验任务为出发点,以微生物学基本技能为切入点”的教材编写思路,筛选出了微生物形态检测、微生物消毒灭菌、微生物培养基制备、微生物接种、微生物分离纯化、微生物计数、微生物菌种保藏、微生物生理生化鉴定、微生物血清学鉴定等9项基本技能,并以9项基本技能为基础,重点培养学生对食品微生物和食品生产环境微生物的综合检测能力,将食品微生物检验室的筹建和质量管理作为教材制高点,作为学生更高的职业目标的贮备能力。
本书配有电子课件与《学生实践技能训练手册》,可从www.cipedu.com.cn下载使用。
本书适合作为高等职业院校农产品加工与质量检测、绿色食品生产与检验、食品检测技术、食品营养与卫生、食品质量与安全、食品营养与检测等食品类专业教材,也可作为相关技术人员的参考用书和行业培训教材。
1.“十二五”职业教育国家规划教材
2.从企业的实际要求出发,分析了企业的微生物检测典型的工作任务,对工作任务中包含的关键技能进行了分析,同时参考国家职业标准有关要求,按照突出重点、覆盖全面、难易结合的原则,形成“以企业微生物典型检验任务为出发点,以微生物基本技能为切入点”的教材编写思路。
前言
随着人们生活水平的不断提高,对食品数量的需求已经逐步过渡到对食品品质的要求,近几年,大量的食品安全事件被曝光,引发了人们对食品安全的极大关注。国家和政府高度重视食品安全问题,新修订的《中华人民共和国食品安全法》在2015年正式颁布实施。2011年8月国家开展了全国性的“打四黑、除四害”行动,其中三项(打击制售假劣食品药品的“黑作坊”、打击制售假劣生产生活资料的“黑工厂”、打击收赃销赃的“黑市场”)涉及了食品生产、运输、销售等关键环节。2013年,十八届三中全会中提出“完善统一权威的食品药品安全监管机构,建立严格的覆盖全过程的监管制度,建立食品原产地可追溯制度和质量标识制度,保障食品药品安全。”可见,政府已把食品安全问题作为关乎国家和民族存亡的重大问题来抓,成为中国未来若干年持续的热点和敏感问题,相关企业的食品安全管理策略和措施也将随之面临调整和改进。
微生物的污染和防控是保障食品安全的一个基本环节,涉及食品原料的管理、生产过程的管理、储存管理、运输管理、销售管理等全过程。在食品企业的HACCP体系中,对微生物的防控是重要内容,具备扎实的微生物理论和操作技能对于满足未来食品企业品质管理和品质检验要求具有重要的意义。微生物检测是食品类专业的核心课程,也是食品行业和食品企业的关键技术。
本教材从企业的实际要求出发,分析了企业微生物检测典型的工作任务,对工作任务中包含的关键技能进行了分析,同时参考国家职业标准有关要求,按照突出重点、覆盖全面、难易结合的原则,形成“以企业微生物典型检验任务为出发点,以微生物学基本技能为切入点”的教材编写思路。筛选出了微生物形态检测、微生物消毒灭菌、微生物培养基制备、微生物接种、微生物分离纯化、微生物计数、微生物菌种保藏、微生物生理生化鉴定、微生物血清学鉴定等9项基本技能,并以9项基本技能为基础,重点培养学生对食品微生物和食品生产环境微生物的综合检测能力,将食品微生物检验室的筹建和质量管理作为教材制高点,作为学生更高的职业目标的贮备能力。
本书对传统微生物检测的知识和技能体系进行了较大调整,在编写体例上力求有所突破和创新,特别强调技能的实用性和难度的延伸性,试图在学生专业能力、社会能力的培养方面实现系统化的均衡发展,为学生未来职业规划提供有力的专业背景支撑,教材系统地、有针对性地形成了“双能力(微生物检测能力和实验室管理能力)并行,职业技能贯通(食品检验工—实验室主管)”的编写特色。本书配有电子课件和《学生实践技能训练手册》,可从www.cipedu.com.cn下载使用。
本书在编写过程中参阅了近年大量的微生物教材、国家标准、行业规范、企业文件,同时得到了食品论坛众多网友的支持,在此一并表示感谢。
本教材虽在一版基础上进行了认真修订,但也难免存在欠妥之处,敬请同行批评指正,编写组将不胜感激。
编者
2016年4月
版前言
随着人们生活水平的不断提高,对食品数量的需求已经逐步过渡到对食品品质的要求。近几年,大量的食品安全事件被曝光,引发了人们对食品安全的极大关注。国家和政府高度重视食品安全问题,新的《中华人民共和国食品安全法》在2009年正式颁布实施,配套的《食品安全国家标准管理办法》在2010年相继颁布。2011年8月,国家又开展了全国性的“打四黑除四害”行动,其中三项(打击制售假劣食品药品的“黑作坊”、打击制售假劣生产生活资料的“黑工厂”、打击收赃销赃的“黑市场”)都涉及了食品的生产、运输、销售等关键环节。政府已把食品安全问题作为关乎国家和民族存亡的重大问题来抓,它将是中国未来若干年持续的热点和敏感问题。
微生物污染的防控是保障食品安全的一个基本环节,涉及食品原料的管理、生产过程的管理、储存管理、运输管理、销售管理等食品流通的全过程。在食品企业的HACCP体系中,对微生物的防控是重要内容,具备扎实的微生物理论和操作技能对于满足未来食品企业的品质管理要求具有重要的意义。微生物检验是食品类专业的核心课程,也是食品行业和食品企业的核心技术。
本教材从企业的实际要求出发,分析了企业中微生物检测典型的工作任务,对工作任务中包含的关键技能进行了分析,同时参考国家职业标准的有关要求,按照突出重点、覆盖全面、难易结合的原则,形成“以企业微生物典型检验任务为出发点,以微生物基本操作技能为切入点”的教材编写思路。筛选出了微生物观察技术、微生物消毒灭菌技术、微生物接种技术、微生物培养基制备技术、微生物分离纯化技术、微生物计数技术、微生物菌种保藏技术7项基本技能,以7项基本技能为基础,重点培养对食品微生物和环境微生物的综合检测能力,将食品微生物检验室质量管理作为教材的制高点,引导学生向更高的职业目标迈进。教材系统地、有针对性地构建了食品微生物检验人员的知识和能力框架,形成了“双能力(微生物检测能力和实验室管理能力)融合,职业技能贯通(食品检验工—实验室主管)”的教材编写特色。
本书由郝生宏、关秀杰担任主编,其中绪论由郝生宏、金岩编写;模块一的任务一由金岩编写;模块一的任务二、三、四;附录一、二、三、四由胡志凤编写;模块一的任务五、六、七由孙睿编写;模块二的任务一由关秀杰编写;模块二的任务二由吴佳莉编写;模块三由关秀杰编写;模块四由郝生宏编写;杨荣芳负责附录五的编写;郝生宏、杨荣芳负责附录六的编写;杨荣芳、胡克伟、魏丽红、肖彦春、雷恩春、蔡智军、郑虎哲、刘丽云、李文一、富新华、郝长红、李晗负责前期企业调研和任务分析;燕香梅、王成义、高慧君给教材编写提供了宝贵建议;郝生宏负责教材大纲的编制和后期统稿。
本书由吉林省德大集团的王安国担任主审。
本书在编写过程中参阅了近年大量的微生物教材、国家标准、行业规范、企业文件,同时得到了食品论坛众多网友的支持,在此一并表示感谢。由于无法在书中全部标出资源出处,在此表示歉意。
本书适用于农产品检测、食品加工、食品营养等食品类专业,在知识和技能体系方面进行了较大的调整,力求有所突破和创新,但难免存在考虑不周之处,敬请同行批评指正,编写组将不胜感激。
编者
2012年4月
绪论1
一、微生物的概念1
二、微生物的特点2
三、微生物污染3
四、微生物与食品安全6
五、食品企业微生物防控措施6
六、微生物检验的范围7
七、微生物检验技术的发展7
【拓展学习】微生物学的发展简史9
【思考题】11
模块一微生物学基本操作技能12
任务一微生物形态检测12
【理论前导】12
一、细菌12
二、放线菌21
三、酵母菌24
四、霉菌28
【技能训练】31
技能一普通光学显微镜的使用31
技能二革兰染色33
技能三微生物大小的测定34
【拓展学习】其他类型的显微镜的使用35
【思考题】38
任务二微生物的消毒灭菌38
【理论前导】38
一、干热灭菌法39
二、湿热灭菌法39
三、过滤除菌40
四、紫外线杀菌41
五、药物杀菌42
【技能训练】43
技能一干热灭菌43
技能二高压蒸汽灭菌44
技能三紫外杀菌45
技能四药物杀菌46
【拓展学习】无菌室的消毒处理及超净工作台的使用48
【思考题】50
任务三微生物培养基的制备50
【理论前导】50
一、培养基的营养50
二、培养基的种类51
三、培养基配制的原则54
四、培养基配制的方法55
【技能训练】56
技能一牛肉膏蛋白胨培养基的制备56
技能二PDA培养基的制备58
技能三高盐察氏培养基的制备58
【拓展学习】微生物的营养物质60
【思考题】63
任务四微生物的接种63
【理论前导】63
一、无菌室或无菌条件64
二、接种工具64
三、接种方法64
【技能训练】65
技能微生物斜面接种65
【拓展学习】微生物培养方法66
【思考题】69
任务五微生物的分离纯化69
【理论前导】69
一、无菌技术69
二、用固体培养基分离纯培养71
【技能训练】75
技能一微生物稀释倒平板分离75
技能二微生物涂布平板分离77
技能三微生物平板划线分离78
【拓展学习】其他分离培养方法80
【思考题】82
任务六微生物的计数83
【理论前导】83
一、直接计数法(计数板)83
二、稀释平板计数法84
三、最大可能数计数法85
四、比浊法87
五、浓缩法88
【技能训练】88
技能一血细胞计数板计数88
技能二稀释平板法计数89
【拓展学习】微生物的其他计数方法91
【思考题】92
任务七微生物菌种保藏92
【理论前导】92
一、菌种保藏的目的92
二、菌种保藏的原理93
三、菌种保藏的方法93
【技能训练】99
技能微生物菌种的斜面低温保藏99
【拓展学习】其他的菌种保藏方法101
【思考题】102
任务八微生物生理生化鉴定103
【理论前导】103
【技能训练】104
技能一糖、醇、糖苷类碳源的分解试验104
技能二甲基红(MR)试验105
技能三乙酰甲基甲醇(VP)试验105
技能四吲哚试验106
技能五淀粉水解试验107
技能六果胶分解试验107
技能七油脂水解试验108
技能八石蕊牛乳试验109
技能九微生物生化反应快速鉴定试验(纸片法)109
【拓展学习】微生物的代谢111
【思考题】115
任务九微生物血清学鉴定115
【理论前导】115
一、凝集试验115
二、沉淀试验118
三、补体结合试验119
【技能训练】119
技能一载玻片凝集反应119
技能二试管凝集试验120
技能三沉淀试验121
【拓展学习】现代微生物免疫学技术122
【思考题】123
模块二食品微生物检测124
任务一食品微生物样品的采集与制备124
【理论前导】124
一、食品微生物检验流程124
二、食品检样的取样方案124
三、食品微生物样品采集124
四、食品检样的预处理127
五、食品检样的保存与送检131
【技能训练】131
技能一固体样品的采集与制备131
技能二液体样品的采集与制备132
【拓展学习】食品微生物取样计划133
【思考题】134
任务二食品微生物检验134
【理论前导】134
一、食品的菌落总数134
二、食品中的大肠菌群135
三、食品中的霉菌和酵母菌136
四、食品中的沙门菌136
五、食品中的金黄色葡萄球菌136
六、乳品中的乳酸菌137
七、罐头食品的商业无菌要求137
八、食品中的单核细胞增生李斯特菌138
九、食品中的志贺菌138
十、食品中的致泻性大肠埃希菌138
十一、食品中的副溶血性弧菌138
十二、食品中的阪崎肠杆菌139
十三、食品中的双歧杆菌139
十四、食品中的大肠埃希菌139
【技能训练】139
技能一食品中菌落总数检测139
技能二食品中大肠菌群检测142
技能三食品中霉菌和酵母菌检测145
技能四食品中沙门菌检测147
技能五食品中金黄色葡萄球菌检测154
技能六乳品中乳酸菌检测157
技能七罐头食品的商业无菌检测160
技能八食品中单核细胞增生李斯特菌检测168
技能九食品中志贺菌检测171
技能十食品中致泻大肠埃希菌检测178
技能十一食品中副溶血性弧菌检测183
技能十二食品中阪崎肠杆菌检测188
技能十三食品中双歧杆菌检测191
技能十四食品中大肠埃希菌检测195
【拓展学习】测试片法在微生物快速检测中的应用197
【思考题】199
模块三食品生产环境微生物检测200
【理论前导】200
一、空气洁净度的微生物检测200
二、水质的微生物学检验203
【技能训练】205
技能一生活饮用水中细菌总数和总大肠菌群的检测205
技能二生产车间空气中微生物的测定207
技能三工作台(机械器具)表面与工人手表面的微生物检测208
【拓展学习】食品包装材料的微生物检测210
【思考题】212
模块四食品微生物检验室的管理213
任务一食品微生物检验室的筹建213
【理论前导】213
一、检验室的设计和建设213
二、食品微生物检验室的环境监测221
三、食品微生物检验室人员的配备与管理222
四、仪器设备的配置与管理226
五、食品微生物检验室试剂和材料的配置与管理232
【技能训练】234
技能以一个乳制品企业为例,设计该企业微生物检验室的筹建方案234
【拓展学习】食品微生物检验室常用设备维护与保养235
【思考题】237
任务二食品微生物检验室的质量管理237
【理论前导】237
一、食品微生物检验室的质量管理体系237
二、食品微生物检验室质量体系文件237
三、食品微生物检验室内部审核240
四、食品微生物检验室管理评审244
五、食品微生物检验室文件管理245
六、食品微生物检验室记录管理247
七、食品微生物检验室样品管理250
【技能训练】251
技能以一个乳制品企业为例,设计该企业微生物检验室的质量管理方案251
【拓展学习】食品检验室的计量认证、审查认可与实验室认可251
【思考题】253
附录254
附录一微生物检验室玻璃器皿的洗涤和包扎254
附录二常用染色剂的配制257
附录三常用缓冲溶液的配制258
附录四常用培养基的配制262
附录五中国食品微生物限量规定269
附录六中国部分食品安全标准微生物限量规定275
附录七实验室意外事故的处理278
参考文献279