本书分为免疫标记技术基于组织学技术方法的免疫分析技术基于电泳技术方法的免疫分析技术抗体的制备、纯化及标记技术层析技术用于免疫细胞分析的通用技术各类免疫细胞分离、功能检测技术及免疫学实验技术的综合应用8个部分。从分子、细胞、动物等几个层面分别介绍免疫学实验技术的基本原理及操作步骤。在实验技术的选择上,力求结合科研实践及发展前沿,在内容撰写时,力求言简意赅、通俗易懂,同时,在每节附有免疫学技术在科研应用中的实际案例,期望帮助学生开阔视野、提高知识的应用能力。免疫学实验技术的综合应用章节包含了4个先后接续的实验,可作为一个完整的课题型实验应用于免疫学实验课的实际教学中。本书可作为高等院校生物学及医学相关专业本科生、研究生的免疫学实验课教材使用。
免疫学实验技术原理与应用作为生物医学研究领域中发展最为迅速的学科之一,免疫学已成为生物医药专业本科生及研究生教育中非常重要的专业课。目前,国内虽有众多免疫学基础理论及实验教材出版,但大多着眼于医药专业学生的需求,鲜见结合生物医学科研实践、为即将从事生命科学基础研究的学生所编写的实验技术类教材。但作为一门实践学科,免疫学基础理论的学习如果脱离实验研究,将很难实现学生对核心知识的真正掌握及未来对理论知识的灵活运用。因此,编写一本适合生物学、生物技术、生物工程、生物医学工程等专业学生的免疫学实验技术教材,十分迫切和必要。目前已出版的免疫学实验技术类书籍主要包括两大类。一类以精讲免疫学技术原理为主,如中国科学家曹雪涛教授主编的《免疫学技术及其应用》、美国科学家JE科利根教授主编的《精编免疫学实验指南》等。这类书籍力求全面、详细地介绍各类免疫学实验技术和方法,内容非常翔实,篇幅往往以百万字计,更适合作为一线科研工作者的实验参考工具书。另一类则是以介绍免疫学实验技术的基本原理、基本操作为主,但这类书籍有关免疫学实验原理的介绍较为简略,因此,这类书籍可作为本科生实验课程的缩略版参考资料。以上两类书籍均不太适用于综合类院校生物专业本科生及研究生免疫学实验课程的需求。本教材编者本着OBE教学理念,基于我校及兄弟院校生物相关专业本科生及研究生的学习背景,结合学生未来职业发展需求,以免疫学原理在实际生物医学科研中的应用为总体编写思路,在参考同类优秀教材基础上,完成了本教材的编写。本教材的主要特点为,较为详尽地介绍了各类免疫学技术的实验原理及实验操作步骤,并在大部分实验技术章节中添加了已公开发表的免疫学技术在实际科研工作中的应用案例,从而帮助学生拓宽视野、更加深入地理解相关的免疫学实验技术原理、提升免疫学实验技术的应用能力。本书第8章以一个实际的科研应用为出发点,由4个前后接续的免疫学实验所构成,可作为生物类院校免疫学实验课综合应用环节的参考。本书编者由衷希望本书能够成为适于各综合性高校生物专业的通用教材,同时也能兼供医学专业学生参考。感谢北京理工大学教务处和生命学院的相关领导、同事们对本书编写工作的大力支持和指导。在本书撰写过程中,北京理工大学生命学院吕芳副教授及李玉娟副教授在层析技术章节及各章节中涉及的动物实验操作技术、免疫分子检测分析技术等部分完成了大量的文字撰写、资料查阅、图片处理及后期文字校对等工作;北京理工大学生命学院任浩同学及万众同学在每章节知识窗部分完成了文献查阅、部分文字撰写等工作;北京理工大学生命学院陈厶文、那扎开提·帕力哈提等同学完成了本教材的格式整理、文字校对等较为繁杂的工作,在此对几位老师及同学的辛勤付出表示感谢。本书中插图大多参考自免疫学专家、名师编著的同类教材,本书编者结合自身需求略加修改,在此谨对这些教材的编者们表示衷心感谢。附录中实验耗材和仪器设备的图片均来源于各大相关生物公司网站,在此一并表示感谢!由于编者学识有限,教材编写过程中难免出现不足之处,真诚希望各位同行及读者不辞吝教、批评指正!
王睿,女,北京理工大学生命学院教师。2007年毕业于北京协和医学院,获免疫学专业博士学位。2007年9月进入北京理工大学工作至今,持续开展空间生物学效应免疫学机理研究,主持或参与多项国※级、校级研究项目,发表多篇学术研究论文。多年来独立讲授《免疫学》、《人体解剖生理学》、《生命科学基础》等多门本科生及研究生课程,建设慕课《基础免疫学》,授课效果得到历届学生好评。教学工作中注重教学方法研究及教学技能提升,多次在省部级、校级教学基本功大赛中获奖,如2017年荣获北京高校第十届青年教师基本功比赛二等奖、全国高校生命科学类微课教学比赛一等奖和教学风采奖、第二届三联杯中国生化与分子生物学微课竞赛二等奖等奖项。
1.1酶免疫技术001
1.2放射免疫技术007
1.3化学发光免疫分析技术012
第2章基于组织学技术方法的免疫分析技术014
2.1免疫组织(细胞)化学技术014
2.2免疫电镜技术017
2.3免疫荧光技术020
第3章基于电泳技术方法的免疫分析技术025
3.1免疫印迹技术025
3.2免疫共沉淀技术033
第4章抗体的制备、纯化及标记技术037
4.1多克隆抗体的制备038
4.2单克隆抗体的制备及纯化040
第5章层析技术048
5.1凝胶过滤层析048
5.2离子交换层析050
5.3亲和层析054
5.4具体实验举例056
第6章用于免疫细胞分析的通用技术062
6.1流式细胞分析检测技术062
6.2免疫细胞凋亡检测技术071
第7章各类免疫细胞分离、功能检测技术082
7.1淋巴细胞的分离纯化082
7.2T淋巴细胞增殖反应090
7.3巨噬细胞的分离、体外培养及功能检测技术096
7.4树突状细胞的分离、体外培养及功能检测技术104
7.5自然杀伤性细胞的分离及功能检测技术109
第8章免疫学实验技术的综合应用117
8.1CIA小鼠模型的制备118
8.2CIA小鼠关节炎症及外周血中炎症因子的测定121
8.3CIA小鼠适应性免疫功能的测定125
8.4CIA小鼠膝关节中巨噬细胞的测定129
附录Ⅰ免疫学实验中的常用工具及耗材132
附录Ⅱ常用实验设备134