本书是由李卫芳副教授主编中国科学技术大学出版社于2012年出版的《生物化学与分子生物学实验》教材的第2版,共有25个基础性实验和1个综合性实验。其内容包括蛋白质、核酸、酶、糖等生物大分子分离纯化、分析和定量检测的技术和方法,以及围绕葡萄糖异构酶GI的克隆、分离纯化和酶活鉴定的综合性实验课程。随着生物学发展的日新月异,新仪器、新技术,新方法的不断涌现,本书在前版的基础上,结合中国科学技术大学生命科学学院实验教学中心现有仪器,从实验设计、实验选材到实验操作都进行了修改调整,并增加了5个新的实验。本教材编写目的是供综合性大学、师范大学、医学院校及农业院校等生物化学专业本科生、生物学系非生化专业研究生的实验指导教材,也可供从事生物化学、分子生物学研究的研究人员参考。
李卫芳,中国科学技术大学生命科学学院副教授,博士,多年从事实验教学工作。已出版主编教材《生物化学与分子生物学实验》。
前言
第pan>部分 基础生物化学与分子生物学实验
实验pan>蛋白质的定量测定
实验2核酸的定量测定
实验3糖的定量测定
实验4不同去污剂对红细胞细胞膜的溶解作用比较·
实验5凝胶过滤层析柱的装填及柱效测定
实验6葡聚糖凝胶柱层析
实验7离子交换柱层析法分离蛋白质·
实验8硫酸铵沉淀法分离纯化核酮糖-pan>,5-二磷酸羧化酶/加氧酶
实验9聚丙烯酰胺凝胶电泳分离植物过氧化物酶同工酶(活染色法)
实验10SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量
实验1pan>等电聚焦电泳
实验12双向电泳
实验13酶联免疫吸附测定法
实验14蛋白质免疫印迹技术
实验15交联法鉴定蛋白质的聚集特
实验16肌动蛋白的体外聚合和共沉降
实验17用正交法测定几种因素对酶活力的影响
实验18酸磷酸酯酶动力学质的分析
实验19质粒DNA的提取
实验20质粒DNA的酶切与电泳鉴定
实验21 PCR基因扩增
实验22DNA样品的胶回收及连接
实验23大肠杆菌感受态细胞的制备及转化
实验24酿酒酵RNA的提取、纯化与鉴定
实验25 反转录PCR和实时荧光定量PCR
第2部分 综合生物化学与分子生物学实验
实验26葡萄糖异构酶(GI)基因的克隆、表达、纯化与质鉴定
第3部分生物化学与分子生物学实验
实验27液相层析法定量测定各种糖类物质
实验28荧光偏振法测定生物大分子间的相互作用
实验29凝胶迁移实验鉴定蛋白质和核酸的相互作用
实验30等温滴定量热法定量测定蛋白质和配体间的相互作用
实验3pan>微量热泳动法定量分析生物分子间的相互作用
附录
附录pan>学生实验守则
附录2实验室及防护知识
附录3实验室用水常识
附录4玻璃器皿的洗涤和常用洗液的配制
附录5常见市售酸碱的浓度
附录6相对原子质量表(200pan>)
附录7硫酸铵饱和度常用表
附录8常用分子量标准参照
附录9常用核酸蛋白数据换算
附录10常用培养基
附录1pan>常用抗生素
附录12缓冲液的配制
附录13电泳相关的常用缓冲液的配制
附录14层析填料的技术参数
附录15分子生物学常用软件